目的：采用原代分离培养Sprague-Dawley（SD）大鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells，BMECs）和星形胶质细胞（astrocyte，As）建立相对简单可靠、重复性好、接近在体状态的体外血脑脊液屏障（blood-cerebrospinal fluid barrier，blood-CSF barrier）模型。方法：原代分离、纯化和培养BMECs 和As，通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞；通过培养在具有特殊质材和孔径的Transwell 小室上建立体外血脑脊液屏障实验模型，采用倒置显微镜观察细胞形态结构，经跨内皮电阻值（trans endothelialelectrical resistance，TEER）、4 h 液面试漏实验、两种特征性酶检测、荧光素钠通透性（sodium fluorescent，Na-FLU）评价模型的屏障功能。结果：原代培养的BMECs 具有典型的“铺路石”样外观，Ⅷ因子鉴定细胞纯度在95% 以上；As 有细长突触，胞质较浅，胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic portein，GFAP）鉴定细胞纯度在95% 以上。通过测定TEER 值共培养模型组显示高电阻值（378.97±11.38） Ω·cm2；4 h 液面试漏试验阳性；γ- 谷氨酰转肽酶（γ-glutamyltranspeptidase，γ-GT）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）表达分别为（30.88±2.87） μmol·min-1·mL-1 和（2.51±0.88）金氏单位·100 mL-1；Na-FLU 跨膜渗透系数（2.228±0.85）×106 cm·s-1。结论：建立的体外血脑脊液屏障模型在形态学、电阻和通透性方面具备了血脑脊液屏障的基本特性。
