神经药理学报 ›› 2021, Vol. 11 ›› Issue (2): 1-4.DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2021.02.001
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α- 突触核蛋白对内质网应激及细胞凋亡影响
沈原,黄树其,张凯
同济大学附属天佑医院神经内一科,上海,200331,中国
Effects of α-Synuclein on Endoplasmic Reticulum Stress and Apoptosis
SHEN Yuan,HUANG Shu-qi,ZHANG Kai
The Department of Neurology,Shanghai Tianyou Hospital,Shanghai,200331,China
摘要:
目的:构建α- 突触核蛋白(α-synuclein,SNCA)和SNCA 突变基因(SNCAmu)过表达转染293T 细胞,观察内质网应激及细胞凋亡。方法:应用PCR 技术扩增目的基因并插入慢病毒载体质粒,重组质粒的构建及包装293T 细胞,转染24 h 后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达。MTT 法检测未转染的293T 细胞组(CON 组)、转染空质粒的293T 细胞组(NC 组)、转染SNCA 基因质粒的293T 细胞组(OE 组)和转染SNCAmu 基因质粒的293T 细胞组(OEm 组),观察各组细胞病毒转染后不同时间(1、2、3、4、5 d)细胞增殖的情况。Western blotting 法测定SNCA 和SNCAmu 诱导caspase-12 的蛋白表达。结果:成功构建了pGC-FU-SNCA-GFP 和pGC-FU-SNCAmu-GFP 质粒及转染293T 细胞,CON 组、NC 组、OE 组和OEm 组不同时间的细胞增殖具有统计学意义,SNCA 和SNCAmu 可能诱导293T 细胞caspase-12 的蛋白表达。结论:SNCA诱导caspase-12 的内质网应激凋亡途径,可能是帕金森病致病机制之一。
中图分类号: