摘要: 目的:观察淫羊藿次苷Ⅱ(icariside Ⅱ,ICS Ⅱ)抗淀粉样蛋白25-35 片段(Aβ25-35)诱导的大鼠学习记忆减退模型和PC12 细胞损伤的作用,并探索其可能的作用机制。方法:60 只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为5 组:假手术组、模型组、ICS II 低剂量组、ICS II 高剂量组、阳性药组,每组12 只。模型组大鼠双侧海马注射5 μL(2 μg·μL-1)Aβ25-35 诱导大鼠学习记忆减退模型,假手术组大鼠同法注入等体积生理盐水。造模后开始给药,给药组每日分别灌胃ICSII 低、高剂量,阳性药组每日灌胃西地那非,假手术组及模型组灌胃等体积蒸馏水,连续给药15 天。造模10 天后Morris 水迷宫检测大鼠学习记忆功能,连续5 天。行为学检测结束后,ELISA 法测定海马PDE 5 及cGMP 的含量;采用MTT 法和ELISA 法分别检测细胞的活力和细胞死亡情况,通过TUNEL染色检测细胞凋亡情况,通过流式细胞术和Mito-SOX 染色法分别测定细胞内和线粒体内活性氧含量。通过Westren Blot 检测Bcl-2、Bax、BDNF、TrkB 蛋白表达及active-Caspase-3 和p-CREB 的水平。结果:模型组较假手术组大鼠的逃避潜伏期明显延长,象限时间和穿越平台次数明显减少;海马PDE 5 水平增加,cGMP 水平降低,BDNF 及TrkB 蛋白表达明显降低,其相关调控信号CREB磷酸化水平明显降低。然而,ICS Ⅱ高剂量组大鼠逃避潜伏期较模型组显著缩短,象限时间和穿越平台次数明显增加;海马PDE 5 水平降低,cGMP 水平明显升高。BDNF、TrkB 蛋白表达明显增高,其相关调控信号CREB 磷酸化水平明显增加。ICS Ⅱ能够减少Aβ25-35 诱导的PC12 细胞氧化损伤,下调Bax 的表达及active-Caspase-3 的水平,并 上调BCl2、BDNF、TrkB 蛋白表达和CREB 的磷酸化水平。此外,TrkB 抑制剂ANA-12 可阻断ICS II 对Aβ25-35 诱导的PC12 细胞氧化损伤的保护作用。结论:在本实验条件下,ICS Ⅱ可明显减轻Aβ25-35 诱导的大鼠学习记忆减退和PC12 细胞凋亡, 其机制可能与降低PDE 5 和线粒体内活性氧的含量及上调BDNF/TrkB/CREB 信号通路有关。